一、ABI7900熒光定量PCR儀是繼7700、5700型熒光定量PCR儀之后，ABI公司推出的高通量實時熒光定量PCR系統。它是兼容96孔板和384孔板的熒光定量PCR儀，也是可選手工進樣和自動進樣的熒光定量PCR儀。7900HT型熒光定量PCR儀可滿足從中通量到高通量實驗的需求。  

二、ABI7900熒光定量PCR儀主要特點:  

（1）高效平臺(tai)-7900HT系(xi)統(tong)是為支持高通(tong)量而構建(jian)的，光(guang)學(xue)系(xi)統(tong)經優化以適用于384孔板熒光(guang)信號的激(ji)活和實時檢測。  

（2）結果可(ke)靠-7900HT系統(tong)采用(yong)了與7700、5700相同(tong)的定量原(yuan)理，利用(yong)Ct值（Ct定義(yi)為(wei)在(zai)基線上方產生可(ke)檢測到(dao)的統(tong)計學上顯(xian)著(zhu)的熒(ying)光發射(she)的這(zhe)一PCR循環）和起(qi)始(shi)拷(kao)貝數的對應關系，通過外標準曲線精(jing)確(que)計算未知樣(yang)品的起(qi)始(shi)拷(kao)貝數。  

（3）高(gao)度(du)重(zhong)現性-7900HT系(xi)統的(de)熒(ying)光檢測發生(sheng)在PCR對(dui)數期(qi)的(de)起始，因此反應管中各組分沒有(you)任(ren)何限制反應因素，從而確(que)保檢測結果都是精確(que)并能重(zhong)復的(de)。  

（4）先(xian)進的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)檢(jian)測(ce)技術(shu)(shu)-RISM®7900HT熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)定量(liang)PCR系統在不降低速度、分辨(bian)率的(de)(de)情(qing)況下有效提高了產(chan)率，這(zhe)是(shi)基(ji)于先(xian)進的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)檢(jian)測(ce)技術(shu)(shu)：一束激(ji)光(guang)(guang)掃描并激(ji)活384個(ge)孔(kong)的(de)(de)每一個(ge)孔(kong)里的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)染料，熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)信(xin)號通過光(guang)(guang)柵(zha)分光(guang)(guang)，經過分離的(de)(de)多色熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)同時到達(da)CCD攝像(xiang)機(ji)，實現(xian)多色熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)同時檢(jian)測(ce)。  

（5）自動(dong)(dong)(dong)進樣(yang)(yang)裝(zhuang)置(zhi)-7900HT系統配備有自動(dong)(dong)(dong)化(hua)配件(jian)可(ke)取(qu)得高效率。自動(dong)(dong)(dong)化(hua)裝(zhuang)置(zhi)可(ke)容(rong)納84塊384孔板，機(ji)械手臂(bei)可(ke)按一定順序將待測(ce)樣(yang)(yang)品板運送(song)至主機(ji)內，配備的(de)條形碼閱讀器(qi)（Barcodereader）可(ke)自動(dong)(dong)(dong)識(shi)別進入(ru)主機(ji)的(de)樣(yang)(yang)品板編號，使你在(zai)任何時間可(ke)以在(zai)樣(yang)(yang)品行列中插入(ru)或替(ti)代樣(yang)(yang)品板。  

（6）多(duo)(duo)樣(yang)的(de)化學(xue)試劑-7900HT型(xing)熒(ying)光(guang)(guang)定量PCR儀上可使(shi)用的(de)化學(xue)試劑包括TaqMan熒(ying)光(guang)(guang)探針(zhen)法和(he)SYBRGreen熒(ying)光(guang)(guang)染(ran)(ran)料法。TaqMan探針(zhen)法具(ju)有(you)高度(du)的(de)靈敏度(du)和(he)特異性，適(shi)用于實時(shi)定量的(de)多(duo)(duo)重反應(ying)(ying)或單核苷酸多(duo)(duo)態性分(fen)析（SNP）。SYBRGreen染(ran)(ran)料應(ying)(ying)用于目標鑒(jian)定（篩選測(ce)定）或者在只需(xu)用少數幾個反應(ying)(ying)的(de)測(ce)定中為理想。  

（7）有效(xiao)(xiao)防污(wu)染-7900HT系統在(zai)PCR全過程(cheng)中使用專門設計的和始終(zhong)密閉(bi)的樣品管。在(zai)加入樣品和試(shi)劑(ji)后(hou)這些管子便(bian)立即封閉(bi)并在(zai)擴增和檢(jian)測過程(cheng)中保持這種狀態，這樣就可以大(da)大(da)地(di)減少污(wu)染的機會(hui)；此外，7900HT系統不存在(zai)PCR后(hou)處理，有效(xiao)(xiao)防止擴增產物對實(shi)驗環(huan)境的污(wu)染而造成的假陽性。  

（8）多種(zhong)定(ding)(ding)量方(fang)法(fa)-ABIPRISM®7900HT序列檢測(ce)系統軟件為(wei)基因(yin)表達提供一種(zhong)定(ding)(ding)量化方(fang)法(fa)。定(ding)(ding)量是從一個標(biao)(biao)準(zhun)曲線上直接測(ce)定(ding)(ding)目標(biao)(biao)（基因(yin)）的量。相(xiang)對定(ding)(ding)量方(fang)法(fa)是通過與(yu)標(biao)(biao)定(ding)(ding)樣(yang)(yang)品(pin)相(xiang)比較而計算未知(zhi)樣(yang)(yang)品(pin)的量，不(bu)需要(yao)標(biao)(biao)準(zhun)曲線。  

三(san)、原理介紹(shao)：  

1.定量，為了測(ce)定未知樣品(pin)中(zhong)的目標(biao)(biao)（基因）的數(shu)(shu)(shu)量，7900HT系(xi)(xi)統可用(yong)來測(ce)定樣品(pin)的CT，然后用(yong)一條標(biao)(biao)準曲(qu)線來測(ce)定起(qi)始的拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)。在標(biao)(biao)準曲(qu)線的繪制中(zhong)，7900HT系(xi)(xi)統軟件(jian)首先用(yong)已知的起(qi)始拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)的幾種稀釋度(du)計(ji)算它(ta)們的CT值(zhi)。接著，軟件(jian)使用(yong)測(ce)得(de)的CT值(zhi)對應于起(qi)始拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)的對數(shu)(shu)(shu)值(zhi)作圖(tu)。至少在五個(ge)數(shu)(shu)(shu)量級(ji)范圍中(zhong)兩者呈線性(xing)關系(xi)(xi)。  

2.相(xiang)對(dui)(dui)(dui)(dui)定量，對(dui)(dui)(dui)(dui)于基因(yin)表達(da)研究來說，相(xiang)對(dui)(dui)(dui)(dui)定量是(shi)理想的(de)方(fang)法(fa)。這里不是(shi)應(ying)(ying)用標準曲線而(er)是(shi)相(xiang)對(dui)(dui)(dui)(dui)于標定樣品計算(suan)表達(da)水平。用一個(ge)(ge)內(nei)源對(dui)(dui)(dui)(dui)照來標定樣品的(de)量。這一方(fang)法(fa)與(yu)7900HT系統在一個(ge)(ge)多重反應(ying)(ying)中能同(tong)時對(dui)(dui)(dui)(dui)目標和(he)內(nei)源對(dui)(dui)(dui)(dui)照進行定量測(ce)定的(de)能力相(xiang)結(jie)合，可實現(xian)高效、高通量的(de)基因(yin)表達(da)研究。  

3.有效的SNP檢測手(shou)段，除實(shi)時(shi)定量測定以(yi)外，7900HT系(xi)統(tong)包括對于(yu)已知(zhi)的單一(yi)核苷酸多(duo)態性（SNPS）作(zuo)大規模篩選的軟件。在一(yi)對等位基因(yin)系(xi)統(tong)中，用(yong)對應(ying)于(yu)兩個等位基因(yin)的兩個TaqMan探針在同一(yi)個試管中做(zuo)多(duo)重PCR反應(ying)。反應(ying)終止(zhi)時(shi)所產生(sheng)的熒光用(yong)7900HT系(xi)統(tong)進行測定，實(shi)驗(yan)結果通過分析軟件迅(xun)速取得(de)。  

四、儀器規格和(he)技術指標(biao):  

（1）系統組成(cheng)，7900HT熒光(guang)(guang)定量PCR儀(yi)－384孔或96孔可更(geng)換式(shi)半導體控溫PCR儀(yi)，488nm長壽氬離子激光(guang)(guang)器(qi)，X,Y雙軸同步熒光(guang)(guang)掃描頭(tou)。  

（2）光柵和CCD檢測裝置，自動進(jin)樣(yang)裝置，DELLGX270電腦，Windows2000操作系統，儀器控制，數據采集及(ji)結(jie)果(guo)分(fen)析軟件，PrimerExpress引物探針設(she)計軟件。  

（3）大產率，實時定(ding)量檢測－5000樣品/天（標(biao)準模式(shi)），96樣品/35分(fen)鐘（快速模式(shi)），終點SNP分(fen)析－30000樣品/2.5小(xiao)時。  

（4）裝機指標，以99.7%的(de)置信度明確(que)區分濃(nong)度差別兩倍（5000和10000拷貝）的(de)樣品的(de)定量結果試劑和消(xiao)耗品。  

（5）完備(bei)的通用基本試(shi)劑盒(he)和消耗品，十二萬種TaqmanGeneExpressionAssays人、大(da)鼠(shu)、小鼠(shu)基因組基因表達分析(xi)試(shi)劑盒(he)，二百萬種TaqmanValidatedSNPGenotypingAssays人、大(da)鼠(shu)、小鼠(shu)基因組SNP檢測試(shi)劑盒(he)。  

（6）Taqman低(di)密度表達譜(pu)芯片(pian)，CustomAssays代客(ke)設計、合成引物(wu)探針(zhen)服務。